植物原位雜交-湖北原位雜交-貝科新肽
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武漢貝科新肽科技有限公司
- 主營業務:原位雜交,亞細胞定位,蛋白互作,啟動子篩選
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- 公司地址:湖北省武漢市洪山區關山大道289號紫菘逸景華庭二期109棟2層2002-3號
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(夏先生 先生)
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原位雜交(In Situ Hybridization)是指將特定標記的已知核酸序列為探針與細胞或組織切片中核酸進行雜交,從而對特定核酸序列進行定量定位的過程。這個技術可以用于研究細胞或組織中特定基因或DNA序列的表達和定位,染色體原位雜交,從而幫助研究者深入理解和探究生物學過程。原位雜交有幾種不同的類型,包括熒光原位雜交和其他用于基因表達分析的方法。

原位雜交第三天
1) ? ? ? ?用1ml含10%熱滅清的MABT溶液置換溶液,放置搖床上25分鐘,然后用1mlMABT置換,熒光原位雜交,25分鐘,再用1mlMABT溶液置換,植物原位雜交,一小時以上,后用1mlMABT溶液置換,25分鐘。
2) ? ? ? ?用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次,每次放置五分鐘。
3)將胚胎轉入十六孔板中,吸去staining buffer,加上300ul BM Purple AP Substrate(底物,用之前加5mM左旋米唑),十六孔板外面包上錫箔紙以避光,避免搖動,室溫下顯色。
4)每隔一小時觀察胚胎是否開始顯色
5)將顯色完全的胚胎中的底物吸出,用PBST洗兩三次后加上4%多聚甲醛固定,拍照。
6)4C冰箱保存。

FISH是原位雜交技術大家族中的一員,因其所用探針被熒光物質標記(間接或直接)而得名,該方法在80年代末 被發明,湖北原位雜交,現已從實驗室逐步進入臨床診斷領域。基本原理是熒光標記的核酸探針在變性后與已變性的靶核酸在退火 溫度下復性;通過熒光顯微鏡觀察熒光信號可在不改變被分析對象(即維持其原位)的前提下對靶核酸進行分析。DNA熒光標記探針是其中常用的一類核酸探針。利用此探針可對組織、細胞或染色體中的DNA進行染色體及基因水平 的分析。熒光標記探針不對環境構成污染,靈敏度能得到保障,可進行多色觀察分析,因而可同時使用多個探針,縮 短因單個探針分開使用導致的周期過程和技術障礙。

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